ราชินีลูกทุ่ง เป็นเรื่องราวของสาวน้อยชื่อ กุ้งนาง (พิงค์กี้ สาวิกา) ผู้มีพรสวรรค์ในการร้องเพลงลูกทุ่ง แต่เธอกลับถูกแม่แก้วตา (ศิรินทรา นิยากร) ห้ามไม่ให้ร้องเพลงลูกทุ่งเด็ดขาด โดยไม่รู้เหตุผลที่แท้จริง จนกระทั่งวันหนึ่ง แม่ของกุ้งนางเกิดป่วยหนัก กุ้งนางต้องการหาเงินมารักษาแม่ จึงไปประกวดร้องเพลงลูกทุ่ง แต่ผลการแข่งขันเธอได้เพียงตำแหน่งรองชนะเลิศ ทำให้เงินรางวัลที่ได้ไม่พอค่ารักษา แม้จะได้เงินจากการช่วยเหลือของ ครูชาตรี (สุรชัย…
นกยูง (เขมนิจ จามิกรณ์) เป็นลูกสาวคนเดียวของ ก้องหล้า เกรียงไกร (สุรชัย สมบัติเจริญ) อดีตราชาเพลงลูกทุ่งที่เสียชีวิตบนเวทีเพราะเมาเหล้าอย่างหนัก นกยูงและศรีนวล (อุษณีย์ รักกสิกร) ผู้เป็นแม่จึงระเหเรร่อน แต่ได้ มังกร (ทนงศักดิ์ ศุภการ) ครูใหญ่ของโรงเรียนมาอุปการะไว้ในฐานะภรรยาใหม่และลูกบุตรธรรม หลายปีผ่านไป นกยูงซึ่งชอบร้องเพลงเหมือนพ่อโตขึ้น…